南方医科大学南方医院，1皮肤科，2药学部，广东省广州市 510515

张 敏★，男，1971年生，湖南省株洲市人，汉族，南方医科大学在读硕士，主治医师，主要从事皮肤性传播疾病的研究。
zhangmin689@
hotmail.com

通讯作者：曾 抗，主任医师，博士生导师，南方医科大学南方医院皮肤科，广东省广州市 510515
npfk@fimmu.com

广东省科技计划项目（2003C104034）*

中图分类号:R329.5 文献标识码:A
文章编号:1673-8225
(2007)13-02420-05

收稿日期：2007-01-06
修回日期：2007-01-25
（07-50-1-87/Y·Q）

Dermal toxicological experiment on podophyllotoxin-solid lipid nanoparticles *★

ＡＩＭ：To estimate the safety of podophyllotoxin-solid lipid nanoparticles (PPT-SLN) on skins.
ＭＥＴＨＯＤＳ：The experiment was performed at the Laboratory of Department of Pharmacy, Southern Medical University from December 2005 to November 2006. Totally 140 Wistar rats and 78 Fmmu guinea pigs were involved. 5, 50 mg/L PPT-SLN and blank SLN were prepared using the modified method of emulsion-evaporation at a high temperature and solidification at a low temperature. ①A total of 48 guinea pigs were selected and assigned into 5, 50 mg/L PPT-SLN and blank SLN intact skin group and dermal injury group by random digits table method, 4 in each group. These guinea pigs received single and multiple dosing skin stimulus tests. Single dosing methods: After bilateral symmetric depilation, back of guinea pigs was cut as "#" shape by operating knife blade till staxis. In homobody left and right sides own control test, left side was as test region. 5, 50 mg/L PPT-SLN and blank SLN suspension (0.1 mL) was spread on test region, and right side was as blank control region. Self-made monolayer plastic film and double layer gauze were used to wrap the test region. Medicine-treated region with or without erythema and edema was observed at hours 1, 24 and 48 after removing dressing and cleaning test region. The recovery of above-mentioned change and time were also recorded. Multiple dosing methods: treatment approach, observational index and evaluation index were the same as above-mentioned data, administering once a day for 14 days successively. ②140 rats were selected and divided into 5, 50 mg/L PPT-SLN and blank SLN intact skin groups, dermal injury group and normal control group, with 10 in each group. These rats received acute and long-term dermal toxicity test. Acute toxicity test method: After depilation, 5, 50 mg/L PPT-SLN and blank SLN suspension (1 mL) evenly spread on test region, respectively, for 14 days successively. Body mass, food-intake, skin, respiration, body carriage, eye, central nervous system, activity of limbs, excrement and death of rats were recorded every day. Long-term toxicity test methods: dermal disposal method and observational index were the same as above-mentioned data, 0.1 mL dosing once a day for 30 days successively. After last administration, animals were killed 24 hours after anaesthesia and 3－4 mL blood was collected for hematology, blood biochemics and dermal pathology tests. ③Totally 30 guinea pigs were divided into 50 mg/L PPT-SLN group, negative control group and positive control group by random digits table method, 10 in each group. These guinea pigs received dermal allergy test. Method: After depilation, 50 mg/L PPT-SLN suspension, blank SLN suspension and 10 g/L 2, 4-dinitrochlorobenzene (0.1 mL) were spread on left depilating region in the 3 groups, respectively. Self-made monolayer plastic film and double layer gauze were used to wrap the test region. Six hours later, dressing was removed and test region was cleaned. At days 7 and 14, the trial was repeated by the same method for 3 times. Fourteen days after sensibilization upon the last dosing, 0.1 mL of drug was spread on the right depilating region of back of guinea pigs, and then removed 6 hours later, followed by immediately observing the dermal allergy reaction. Dermal reaction was further observed at hours 24, 48 and 72.
ＲＥＳＵＬＴＳ: A total of 140 rats and 78 guinea pigs were involved in the result analysis. ①There was no irritant dermal reaction in intact or injured skin by single or repeated applications of PPT-SLN. ②No acute toxic reaction was observed by single large-dose application of 5 mg/L PPT-SLN and blank SLN in rats. The first 3 and 8 days after administration, toxic symptom all over the body appeared, such as decreases of body mass and appetite, in rats of the 50 mg/L PPT-SLN group, especially in the dermal injury group, and then the symptom recovered gradually. For the groups in which 5 mg/L PPT-SLN and blank SLN were applied daily, there was no obviously long-term toxic reaction. ③Mild erythema, edema, erosio and scab appeared in the 50 mg/L PPT-SLN group 18-25 days after administration, and the inflammatory reaction was extinct 1 week after drug withdrawal. Acute inflammatory reaction was primarily observed in epidermis histopathology test. No allergic dermal reaction was induced by PPT-SLN in guinea pigs.
ＣＯＮＣＬＵＳＩＯＮ: Within the certain survey period and concentration, no irritant or allergic dermal reaction was induced by PPT-SLN in guinea pigs. Acute toxic reaction all over the body occurs easily by 50 mg/L large-dose applications of PPT-SLN in dermal injury group. However, such a symptom is not observed by 5 mg/L intact dermal applications of PPT-SLN in rats. It is safe and no systemic absorbing toxicity to apply a small dose of PPT-SLN in rats for a long term, but 50 mg/L application of PPT-SLN in rats can cause mild dermal inflammatory reactions.

Zhang M, Zeng K, Li GF, Shi YJ, Yang XX, Jiang ZH.Dermal toxicological experiment on podophyllotoxin?鄄solid lipid nanoparticles.Zhongguo Zuzhi Gongcheng Yanjiu yu Linchuang Kangfu 2007;11(13):2420-2424(China)
[www.zglckf.com/zglckf/ejournal/upfiles/07-13/13k-2420(ps).pdf]

摘要
目的:考察鬼臼毒素－固体脂质纳米粒经皮肤用药的安全性。
方法：实验于2005－12/2006－11在南方医科大学药学部实验室完成。选择Wistar大鼠140只，Fmmu豚鼠78只。采用改良的乳化蒸发－低温固化法制备5，50 mg/L鬼臼毒素－固体脂质纳米粒及空白固体脂质纳米粒。①取豚鼠48只，按随机数字表法分成5，50 mg/L鬼臼毒素－固体脂质纳米粒及空白固体脂质纳米粒完整皮肤组和破损皮肤组，每组4只，分别进行单次和多次给药皮肤刺激试验。单次给药方法：豚鼠背部两侧对称脱毛后用手术刀片作#字划痕，以渗血为度。采用同体左右侧自身对照法，左侧为受试区，分别取5，50 mg/L鬼臼毒素－固体脂质纳米粒及空白固体脂质纳米粒混悬液0.1 mL均匀涂布于受试区，右侧为空白对照区，再以自制单层塑料薄膜和双层纱布封包受试区。分别于去除敷料和清洗受试物后1，24，48 h观察涂药部位有无红斑和水肿等情况，以及上述变化的恢复情况与时间。多次给药方法：皮肤处理方法、观察指标及评价指标同上，每日给药1次，连续给药14 d。②取大鼠140只，按随机数字表法分成5，50 mg/L鬼臼毒素－固体脂质纳米粒及空白固体脂质纳米粒完整皮肤组和破损皮肤组、正常对照组，每组10只，分别进行急性和长期皮肤毒性试验。急性毒性试验方法：脱毛后，分别取5，50 mg/L鬼臼毒素－固体脂质纳米粒及空白固体脂质纳米粒混悬液1 mL均匀涂布于受试区，连续观察14 d，每日观察大鼠体质量、进食量、皮肤、呼吸、体态、眼、中枢神经系统、四肢活动、粪便性状及死亡情况。长期毒性实验方法：皮肤处理方法及观察指标同上，每日给药1次，药量均为0.1 mL，连续给药30 d，末次给药后24 h麻醉后处死动物，取血3~4 mL进行血液学、血液生化学及皮肤病理检查。③取豚鼠30只，按随机数字表法分成50 mg/L鬼臼毒素－固体脂质纳米粒组、阴性对照组及阳性对照组，每组10只，进行皮肤变态反应试验。方法：脱毛后，3组左侧脱毛区分别涂50 mg/L鬼臼毒素－固体脂质纳米粒混悬液、空白固体脂质纳米粒混悬液及10 g/L二四二硝基氯苯0.1 mL，涂药后以自制单层塑料薄膜和双层纱布封包受试区，6 h后去除敷料和清洗受试物。第7天和第14天，以同样方法各重复1次，共3次。于末次给受试物致敏后14 d，将受试物0.1 mL涂于豚鼠背部右侧脱毛区，6 h后去掉受试物，即刻观察皮肤变态反应情况，之后于24，48，72 h再次观察皮肤反应。
结果：纳入大鼠140只，豚鼠78只，均进入结果分析。①单次和多次给予鬼臼毒素－固体脂质纳米粒对豚鼠完整和破损皮肤均无刺激作用。②单次大剂量给予5 mg/L鬼臼毒素－固体脂质纳米粒及空白固体脂质纳米粒，未见对大鼠有急性毒性反应。给予50 mg/L鬼臼毒素－固体脂质纳米粒组大鼠分别于给药后的前3，8 d出现体质量减轻、食欲下降等全身中毒症状，尤以皮肤破损组表现较明显，以后逐渐恢复；每日小剂量给予5 mg/L鬼臼毒素－固体脂质纳米粒及空白固体脂质纳米粒，未见对大鼠有明显长期毒性反应。③给予50 mg/L鬼臼毒素－固体脂质纳米粒组大鼠于给药后的18~25 d，均出现轻度的皮肤红斑、水肿、糜烂和结痂等炎症反应，于停药后1周内消退，皮肤组织病理学检查可见以表皮为主的急性炎症反应；鬼臼毒素－固体脂质纳米粒对豚鼠皮肤无致敏性。
结论：在有效观察时间和一定质量浓度范围内，鬼臼毒素－固体脂质纳米粒对豚鼠皮肤无刺激性及致敏性，对破损皮肤大鼠应用50 mg/L鬼臼毒素－固体脂质纳米粒大剂量时易出现全身急性中毒反应而完整皮肤及5 mg/L鬼臼毒素－固体脂质纳米粒应用则较安全，小剂量长期应用鬼臼毒素－固体脂质纳米粒对大鼠比较安全无系统吸收毒性，但应用50 mg/L鬼臼毒素－固体脂质纳米粒时可以出现轻度的皮肤炎症反应。
关键词：固体脂质纳米粒；鬼臼毒素；皮肤毒理学

张敏，曾抗，李国锋，史毓杰，杨西晓，江中洪.鬼臼毒素－固体脂质纳米粒的皮肤毒理学实验[J].中国组织工程研究与临床康复，2007，11(13):2420-2424 [www.zglckf.com/zglckf/ejournal/upfiles/07-13/13k-2420(ps).pdf]

0 引言

固体脂质纳米粒是近年皮肤靶向性药物载体研究的热点，被认为是脂质体的下一代替代载药技术[1]。鬼臼毒素是从美国鬼臼、桃儿七等生药中提取的一种具有特效的细胞毒性物质，其50 mg/L酊剂是WHO推荐治疗尖锐湿疣的一线外用药物[2]，由于酊剂对皮肤刺激性较大，作用时间短，且大面积使用易产生吸收毒性[3]，故作者用毒性低、生物相容性好的固体脂质材料为载体，将药物吸附或包裹于其中，研制了鬼臼毒素－固体脂质纳米粒。本实验旨在对该新型制剂的外用安全性进行评价。

1 材料和方法

设计：随机分组设计、动物对照观察。
单位：南方医科大学南方医院皮肤科和药学部。
材料：实验于2005－12/2006－11在南方医科大学药学部实验室完成。选择SPF级Wistar大鼠140只，体质量200~250 g，雌雄各半；SPF级Fmmu豚鼠78只，体质量350~400 g，雌雄各半，均由南方医科大学实验动物中心提供（合格证号分别为2005A048，2005A041）。药物：采用乳化蒸发－低温固化[4]为基础并进行改良的制备方法。制备方法如下：精密称取50 mg软磷脂溶于10 mL无水乙醇中，超声30 min使其充分溶解，另取50 mg鬼臼毒素、70 mg硬脂酸和30 mg十八烷酰胺溶于10 mL二氯甲烷中，将乙醇与二氯甲烷混合共同构成油相。精密称取Brij78加入50 mL双蒸水中，超声10 min使其充分溶解，构成水相。将油相加热至（75±2） ℃然后缓慢注入1 000 r/min搅拌的相同温度的恒温水相中，继续搅拌约三四小时，使其有机溶媒完全蒸发并使体系浓缩至约5 mL。将所得的半透明混悬液快速混于另一0 ℃的5 mL冰水中，并在冰水浴超声0.5 h，即得50 mg/L鬼臼毒素－固体脂质纳米粒混悬液。同法制备5 mg/L鬼臼毒素－固体脂质纳米粒混悬液和空白固体脂质纳米粒混悬液。仪器：JB-3A型定时恒温磁力搅拌器（上海雷磁新泾仪器有限公司）；TMP-1型电子天平（德国）；CELL-DYN1700型血球计数仪（美国）；7071A全自动生化检测仪（日本日立公司）。
设计、实施、评估者：设计及实施为第一、二作者，评估为全部作者，均经过专业培训。
方法：
豚鼠皮肤刺激性试验：①急性皮肤刺激试验：取豚鼠24只，按随机数字表法分成6组，即5，50 mg/L鬼臼毒素－固体脂质纳米粒及空白固体脂质纳米粒完整皮肤组和破损皮肤组，每组4只。实验开始前24 h将豚鼠背部两侧对称脱毛，脱毛面积为3 cm×3 cm。破损皮肤组豚鼠用手术刀片在脱毛皮肤区域作#字划痕，以渗血为度。采用同体左右侧自身对照法，左侧为受试区，分别取5，50 mg/L鬼臼毒素－固体脂质纳米粒及空白固体脂质纳米粒混悬液0.1 mL均匀涂布于受试区，右侧为空白对照区，再以自制单层塑料薄膜和双层纱布封包受试区。分别于去除敷料和清洗受试物后1，24，48 h观察涂药部位有无红斑和水肿等情况，以及上述变化的恢复情况与时间，按照每天每只动物平均积分=∑（红斑和水肿总积分/ 受试动物数）/14和文献[5]表12-1与12-2进行皮肤反应积分和刺激强度评价。②多次皮肤刺激试验：另取豚鼠24只，分组、皮肤处理方法、观察指标及评价指标同上，给药1次/d，连续给药14 d。
大鼠皮肤毒性试验：①急性皮肤毒性试验：取大鼠70只，按随机数字表法分成7组，即5，50 mg/L鬼臼毒素－固体脂质纳米粒及空白固体脂质纳米粒完整皮肤组和破损皮肤组与正常对照组，每组10只。给药前24 h将大鼠背部两侧对称脱毛，脱毛面积为6 cm× 7 cm。破损皮肤组大鼠用手术刀片在脱毛皮肤区域作#字划痕，以渗血为度。分别取5，50 mg/L鬼臼毒素－固体脂质纳米粒及空白固体脂质纳米粒混悬液1 mL均匀涂布于脱毛区，再以自制单层塑料薄膜和双层纱布封包受试区，4 h后去除敷料和清洗受试物。连续观察14 d，每日观察大鼠体质量、进食量、皮肤、呼吸、体态、眼、中枢神经系统、四肢活动、粪便性状及死亡情况。②长期皮肤毒性试验：另取大鼠70只，分组、皮肤处理方法及观察指标同上，每日给药1次，药量均为0.1 mL，连续给药30 d，末次给药后24 h麻醉后处死动物，取血3~4 mL进行血液学、血液生化学及皮肤病理检查。
豚鼠皮肤变态反应试验：取豚鼠30只，按随机数字表法分成3组，即50 mg/L鬼臼毒素－固体脂质纳米粒组、阴性对照组及阳性对照组，每组10只。给药前24 h将豚鼠背部两侧对称脱毛，脱毛面积两侧各为3 cm×3 cm。3组左侧脱毛区分别涂50 mg/L鬼臼毒素－固体脂质纳米粒混悬液、空白固体脂质纳米粒混悬液及10 g/L二四二硝基氯苯0.1 mL，涂药后以自制单层塑料薄膜和双层纱布封包受试区，6 h后去除敷料和清洗受试物。第7天和第14天，以同样方法各重复1次，共3次。于末次给受试物致敏后14 d，将受试物0.1 mL涂于豚鼠背部右侧脱毛区，6 h后去掉受试物，即刻观察皮肤变态反应情况，之后于24，48，72 h再次观察皮肤反应。按照致敏率=皮肤变态反应阳性的动物数/受试动物总数和文献[5]表12-5进行皮肤变态反应评分，平均反应值=（红斑形成总分+水肿形成总分）/合计动物数。
主要观察指标：豚鼠皮肤刺激性试验结果，大鼠皮肤毒性试验结果，豚鼠皮肤变态反应试验结果。
统计学分析：由第一作者采用SPSS 10.0进行数据处理，数据以x ±s表示，行t检验。

2 结果

2.1 实验动物数量分析 纳入大鼠140只，豚鼠78只，均进入结果分析，无脱落。
2.2 豚鼠皮肤刺激性试验结果 单次和多次给予受试物后，各组豚鼠在去除敷料和受试物的1~48 h，受试区皮肤均未见红斑和水肿等情况，皮肤刺激反应平均评分值均为0，皮肤刺激强度评价均为无刺激性。试验结果说明，在有效观察时间内，5～50 mg/L鬼臼毒素－固体脂质纳米粒及其基质对豚鼠皮肤均无刺激性。
2.3 大鼠皮肤急性毒性试验结果 单次大剂量给予受试物后，2周内各组大鼠均无死亡现象。给予5 mg/L鬼臼毒素－固体脂质纳米粒及空白固体脂质纳米粒混悬液的各组大鼠，其各项观察指标与正常对照组比较均无异常。给予50 mg/L鬼臼毒素－固体脂质纳米粒混悬液的大鼠，分别于给药后的前3，8 d出现体质量减轻、食欲下降、反应迟钝、粪便色浅及活动减少，尤以皮肤破损组表现较明显，以后逐渐恢复。观察结束时50 mg/L鬼臼毒素－固体脂质纳米粒皮肤破损组大鼠体质量与正常对照组比较有明显差异（表1），而其他各组观察指标未见异常。试验结果说明，在一定质量浓度范围内当皮肤出现破溃时，50 mg/L鬼臼毒素－固体脂质纳米粒大剂量应用容易出现系统吸收毒性，而完整皮肤及5 mg/L鬼臼毒素－固体脂质纳米粒应用则相对安全。

2.4 大鼠皮肤长期毒性试验结果 每日给予小剂量受试物连续30 d后，各组大鼠均未见动物死亡。给药后的18~25 d，50 mg/L鬼臼毒素－固体脂质纳米粒两组大鼠均出现轻度的皮肤红斑、水肿、糜烂和结痂等炎症反应，于停药后1周内消退，皮肤组织病理学检查可见表皮全层或部分变性、坏死，大量中性粒细胞浸润，真皮及皮下组织结构完整，有轻、中度中性粒细胞浸润和部分血管内皮细胞肿胀（图1），其余各项观察指标与正常对照组比较均无明显差异（表2）。5 mg/L鬼臼毒素－固体脂质纳米粒两组大鼠皮肤未见炎症反应及血液学、血液生化学观察指标异常，部分组织病理学检查仅可见少量中性粒细胞浸润。空白固体脂质纳米粒两组大鼠各项观察指标与正常对照组比较均无差异。试验结果说明，在一定观察时间和质量浓度范围内，小剂量长期应用鬼臼毒素－固体脂质纳米粒比较安全无系统吸收毒性，但应用50 mg/L鬼臼毒素－固体脂质纳米粒时可以出现轻度的皮肤炎症反应。
2.5 豚鼠皮肤变态反应试验结果 实验药物组和阴性对照组均未见明显红斑、水肿等症状，也未见哮喘、休克等严重的全身过敏反应。阳性对照组给药后皮肤均有不同程度的红斑、水肿形成，按照评分标准为2.8分，致变态反应率为100%（表3），24，48，72 h后皮肤仍有红斑、水肿出现。试验结果说明，鬼臼毒素－固体脂质纳米粒及基质对皮肤均无致敏性。

3 讨论

鬼臼毒素又名鬼臼素、鬼臼毒、鬼臼脂素，是从鬼臼树脂类木脂素中分离得到的具有显著细胞毒性的天然活性物质。长期以来，鬼臼树脂类木脂素一直作为民间治疗虫蛇咬伤、痛疖肿毒、跌打、催吐、风湿筋骨炎及气管炎等症状的药用成分，而缺乏系统、全面的药理和毒理学机制研究。1861年Bentley发现了鬼臼毒素的

抗肿瘤活性，80年后King和Shllivan阐明了鬼臼毒素具有类似秋水仙碱的抗肿瘤机制，为临床应用于肿瘤的治疗提供了理论依据。虽然鬼臼毒素具有显著的抗肿瘤活性并首先作为静脉用抗肿瘤药物应用于临床，但因系统吸收所致骨髓抑制和胃肠道毒性等毒副作用明显而限制了其在临床直接应用。此后，通过对其母体结构改造所得的一些衍生物如VP16、VM26等虽具有活性高、毒性低的特点，但也存在抗癌谱较窄、水溶性差以及较严重的骨髓抑制和胃肠道反应而限制了它们的应用[6]。

1942年Kaplan[7]首次报道了局部应用鬼臼树脂治疗尖锐湿疣获得了满意效果，从此为鬼臼毒素的临床应用开辟了一条新的途径，其外用制剂的疗效及安全性也逐渐被人们所认识和掌握[8-10]。50 mg/L鬼臼毒素酊剂是临床最常用的质量浓度和剂型，因其疗效肯定、毒副作用相对较小而被WHO推荐为治疗尖锐湿疣的一线药物[2]。由于50 mg/L鬼臼毒素酊存在对皮肤刺激性较大、作用时间短、对人类乳头瘤病毒潜伏感染难以奏效、缺乏良好的皮肤靶向性及大面积使用易产生吸收毒性等不足而限制了其在临床进一步应用。因此，鬼臼毒素新剂型的研究和开发已成为人们关注的热点[11－13]。

固体脂质纳米粒是20世纪90年代初发展起来的新一代亚微粒给药系统，具有生理相容性好、可控制药物释放及良好的靶向性，同时避免了有机溶剂不能完全去除的缺点。固体脂质纳米粒既具备聚合物纳米粒物理稳定性高、药物泄漏慢的优势，又兼具了脂质体、乳剂的毒性低且能大规模生产的优点[14]，此外还在生物毒性、可降解性和长期稳定性等多个方面显示出优势[15]。固体脂质纳米粒作为局部给药的主要特点是可在皮肤表面形成一层黏附性膜，水分挥发导致固体脂质纳米粒分散体变形，于是药物被挤出，从而提高了药物经皮吸收量（闭塞效应），同时能够使药物富集于皮肤表层达到理想的治疗浓度，并避免药物的系统吸收，表现出良好的皮肤靶向性和相对较小的系统吸收毒性[16，17]。此外，固体脂质纳米粒局部给药还具有可避免化学不稳定药物的降解、调节药物的释放和避光效应[18]，以及减少药物对皮肤的刺激作用，优化处方后可以应用于缓解皮肤刺激和过敏等优点[19]。因此，固体脂质纳米粒载体应用于经皮给药系统具有良好的发展前景。
文献报道鬼臼树脂可致表皮红斑、水肿、角质层细胞坏死及皮肤炎症细胞浸润，甚至严重的系统吸收毒性[8，10]。50 mg/L鬼臼毒素酊由于缺乏对病毒感染组织特异的选择作用，常造成正常组织的损伤[3]。10～50 mg/L鬼臼毒素酊对豚鼠皮肤有刺激性而未见致敏性[20]。本实验表明，以毒性低、生物相容性好的固体脂质材料包封鬼臼毒素制备的鬼臼毒素－固体脂质纳米粒，在有效观察时间和一定质量浓度范围内，对豚鼠皮肤无刺激性及致敏性，对破损皮肤大鼠50 mg/L鬼臼毒素－固体脂质纳米粒大剂量应用时易出现全身急性中毒反应而完整皮肤及5 mg/L鬼臼毒素－固体脂质纳米粒应用则较安全，小剂量长期应用鬼臼毒素－固体脂质纳米粒对大鼠比较安全无系统吸收毒性，但应用50 mg/L鬼臼毒素－固体脂质纳米粒时可以出现轻度的皮肤炎症反应。本实验中，作者未观察到豚鼠皮肤刺激反应，考虑可能与鬼臼毒素被固体脂质纳米粒包裹后，避免或减少了其与皮肤直接接触而致缺乏皮肤刺激或刺激强度不足有关。鬼臼毒素尚有导致皮肤血管内皮细胞受损，诱导局部白细胞介素1、白细胞介素2的表达和刺激巨噬细胞活化、增殖等多种生物学活性[9]，这可能是长期应用鬼臼毒素出现皮肤炎症反应的直接原因。因此在疗效肯定的情况下，间歇应用一定质量浓度范围内的鬼臼毒素－固体脂质纳米粒可能是更为合理的方法。

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