课题背景：课题为江苏省卫生厅开放课题基金（WK0510）。拟验证在单核细胞趋化因子1等趋化因子的作用下，循环中的巨噬细胞和中性粒细胞等聚集在动脉壁启动炎症反应，巨噬细胞吞噬脂质形成泡沫细胞，血管平滑肌细胞增殖的反应。

应用要点：实验应用体外培养的人脐静脉内皮细胞，观察糖化白蛋白对人脐静脉内皮细胞表达单核细胞趋化因子1的影响。结果发现糖化白蛋白能明显诱导人脐静脉内皮细胞表达单核细胞趋化因子1。并且随着糖化白蛋白浓度增加和作用时间延长，单核细胞趋化因子1的表达也增加，呈剂量和时间依赖性。

术语解析：单核细胞趋化蛋白作为一种特异性单核细胞趋化因子,通过与单核细胞表面的CCR2的结合使血液中的单核细胞迁入血管内膜下,并活化为巨噬细胞,摄取已进入内膜并发生修饰的脂蛋白形成单核细胞源性泡沫细胞。

背景：研究表明，糖化白蛋白在内皮细胞凋亡过程中发挥重要作用，并通过增加丝裂原活化蛋白激酶、酪氨酸激酶活性和产生活性氧产物介导单核细胞趋化因子1。
目的：观察糖化白蛋白对培养的人脐静脉内皮细胞的单核细胞趋化因子1表达的影响。
设计、时间及地点：单一样本观察，于2006-05/11在东南大学心血管实验室完成。
材料：脐静脉内皮建株人脐静脉内皮细胞ECV304，引自中国科学院上海细胞生物研究所。
方法：实验分两部分，第一部分以糖化白蛋白 (浓度为400 mg/L) 对人脐静脉内皮细胞分别干预0，8，16，24，48，72 h；第二部分以不同浓度 (100，200，400，800 mg/L) 的糖化白蛋白对人脐静脉内皮细胞干预24 h。两部分实验均用无血清培养基RPMI 1640和不含牛血清白蛋白葡萄糖干预 (浓度为400 mg/L) 的无血清培养基作为对照。
主要观察指标：四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法检测人脐静脉内皮细胞增殖，酶联免疫吸附法检测人脐静脉内皮细胞上清液单核细胞趋化因子1含量。
结果：①不同时间点糖化白蛋白对人脐静脉内皮细胞增殖的抑制作用依次为48 h > 24 h > 16 h （相临时间点比较，P均 < 0.05）；干预8 h对细胞的抑制无明显作用，72 h抑制作用弱于48 h。②与RPMI 1640组和牛血清白蛋白组相比，糖化白蛋白400 mg/L及800 mg/L对细胞的抑制作用明显增强（P < 0.05），并随着糖化白蛋白浓度的增高而增强。③用浓度为 400 mg/L的糖化白蛋白干预6 h及12 h，人脐静脉内皮细胞单核细胞趋化因子1表达持续升高（P < 0.05）；随着糖化白蛋白浓度加大，细胞的单核细胞趋化因子1表达进一步增高，800 mg/L时达到最高峰。
结论：①糖化白蛋白以浓度、时间依赖方式抑制人脐静脉内皮细胞增殖，并在一定时间范围内呈时间依赖性地增加人脐静脉内皮细胞表达单核细胞趋化因子1表达。
关键词：糖化白蛋白；单核细胞趋化因子1；人脐静脉内皮细胞；组织构建

张 丽★，女，1968年生，汉族，安徽省蚌埠市人，2007年东南大学临床医学院毕业，硕士，主治医师，主要从事心血管分子生物学研究。
lilynanjing@163. com

通讯作者：马根山，博士，博士生导师，东南大学附属中大医院心内科，江苏省南京市 210009
magenshan@ seu.edu.cn

江苏省卫生厅开放课题基金(WK0510)*

中图分类号: R329.2
文献标识码: A
文章编号: 1673-8225
(2008)28-05422-05

收稿日期：2007- 11-01
修回日期：2008-03-03
(07-50-11-5972/W Y)