重组人促红细胞生成素联合骨骼肌卫星细胞移植对兔急性心肌梗死的影响*
暨南大学第二临床医学院/深圳市人民医院心内科,广东省深圳市 518020
课题背景:课题为深圳市科技局资助项目,编号200602004,项目名称为“促红细胞生成素联合骨骼肌卫星细胞心肌移植的实验研究”,于深圳市人民医院中心实验室在心内科移植小组团队合作下共同完成。目前课题研究已初步证明重组人促红细胞生成素具有提高骨骼肌卫星细胞心肌移植后存活率、协同干细胞可缩小梗死面积的作用。
应用要点:在骨骼肌卫星细胞移植研究出现瓶颈时,引入重组人促红细胞生成素促红细胞生成之外的生理作用,将两者联合移植有可能为骨骼肌卫星细胞下一步研究提供新的方向。此外,采用的异体移植细胞、PCR检测细胞量的方法在目前相关研究中应用者较少,具有避免常用方法中假阳性细胞的影响。 偏倚或不足:重组人促红细胞生成素作为激素,生理机制复杂,可能产生多种生理病理效应,实验未观察重组人促红细胞生成素全身应用可能出现的副作用,因此无法全面评价其在急性心肌梗死治疗中的作用。后续试验可增加移植后细胞凋亡情况等更多的检测指标。
背景:研究发现促红细胞生成素尚具有多种非血液系统生理效应,如参与哺乳动物胚胎的正常发育、抑制炎症、促进血管生长,以及在多种组织和细胞损伤中抑制细胞凋亡、减少梗死面积、促进功能恢复等作用。 目的:观察重组人促红细胞生成素与骨骼肌卫星细胞联合移植对兔急性心肌梗死是否具有积极作用? 设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2006-01/07在深圳市人民医院中心实验室完成。 材料:自体移植:清洁级雄性新西兰大白兔50只,随机分为假手术组、模型对照组、细胞移植组、重组人促红细胞生成素组、联合组,10只/组。异体异性移植:同品系雄性新西兰大白兔10只,作为供体用于制备骨骼肌卫星细胞;另取雌性兔10只作为受体,分为细胞移植组、联合组,5只/组。重组人促红细胞生成素为沈阳三生制药股份有限公司产品。 方法:自体移植实验:除假手术组外,其余4组建立急性心肌梗死模型。重组人促红细胞生成素组、联合组在冠脉结扎同时,采用肌注法一次性给予重组人促红细胞生成素3 000 U/kg;细胞移植组、联合组将含有约107个骨骼肌卫星细胞的DMEM溶液200 μL多点直接注射在心脏表面梗死区。异体异性移植实验:细胞移植组、联合组均建立急性心肌梗死模型,根据分组要求注射骨骼肌卫星细胞和重组人促红细胞生成素,浓度及方法同上,5 d后取材行PCR检测。 主要观察指标:测定心肌梗死面积,免疫组织化学法检测心肌组织血运改善及desmin表达,荧光检测骨骼肌卫星细胞,SRY基因PCR检测结果。 结果:移植后4周与模型对照组比较,细胞移植组、重组人促红细胞生成素组、联合组心肌梗死面积均明显减小(P < 0.05),且联合组减小幅度强于另外两组(P < 0.05)。各组梗死中心区CD34阳性细胞数量与上面结果相似。细胞移植组、联合组心肌组织desmin呈阳性表达,其余3组呈阴性。联合组移植区DAPI标记的蓝色荧光细胞数较细胞移植组明显增多。异体异性移植实验中,联合组SRY基因扩增条带的宽度和亮度均明显强于细胞移植组。 结论:重组人促红细胞生成素与骨骼肌卫星细胞联合移植能够进一步缩小兔心肌梗死面积,改善梗死区血运,提高骨骼肌 卫星细胞移植后的存活率,二者对治疗急性心肌梗死具有协同作用。 关键词:骨骼肌卫星细胞;促红细胞生成素;移植;心肌梗死
陈科奇,男,1964年生,广东省深圳市,汉族,1987年中山医科大学毕业,副主任医师,主要从事心血管方面的研究。
通讯作者:李江华,暨南大学第二临床医学院/深圳市人民医院心内科,广东省深圳市 518020 ljh034@126.com 深圳市科技局资助项目(20060 2004)*
中图分类号:R394.2 文献标识码:A 文章编号:1673-8225 (2008)29-05639-04
收稿日期:2007-11-23修回日期:2008-06-16 (07-50-11-6517/ZS Q)