糖尿病性骨质疏松患者血清自由基代谢与糖骨康的影响*
张 颖1，于文浩2，王秀玲
课题背景：课题组前期研究表明，糖骨康具有调节患者血清炎性细胞因子释放，降低空腹血糖和糖化血红蛋白，提高骨密度的作用。2007年被河北省中医药管理局批准为河北省中医药管理局科学研究计划项目(2007203)，予以立项资助。
应用要点：本组结果表明，①与健康正常组比较，糖尿病骨质疏松患者存在着显著的氧化水平升高，抗氧化能力下降，自由基代谢失衡的状态，这可能是糖尿病并发骨质疏松的原因之一。②糖骨康可降低血清丙二醛含量和血糖水平，提高超氧化物歧化酶活性，具有调节糖尿病骨质疏松患者自由基代谢，降低血糖，抑制骨质疏松的作用。
相关链接：糖尿病骨质疏松属于中医“消渴”“骨痿”范畴，其形成与肾虚密切相关。糖骨康，依照古方虎潜丸的组成改进而成，方中熟地黄、山萸肉、山药、锁阳、龟板可补肾填精；丹参、川芎可活血化瘀，具有全方共奏补肾活血之功效。���
邯郸市第一医院， 1老年病科， 2骨科，河北省邯郸市 056002；3河北省涉县中医院骨科，河北省涉县
056400
张 颖，女，1973年生，河北省涉县人，汉族，2003年河北医科大学毕业，主治中医师，主要从事糖尿病骨质疏松的研究。
ywtawen@163.com
河北省中医药管理局科学研究计划项目(2007203)*
摘要
目的:糖尿病患者常伴有体内过氧化脂质水平的明显升高,而自由基增多可加重糖尿病并发症的发生和发展。糖骨康为治疗糖尿病骨质疏松症的临床验方，观察糖骨康对糖尿病骨质疏松患者骨密度、空腹血糖、糖化血红蛋白和血清超氧化物歧化酶、丙二醛含量的影响。
方法：①对象及分组：选择2003-03/2006-03在邯郸市第一医院老年病科和涉县中医院骨科收治的糖尿病骨质疏松患者139例。随机分为治疗组74例（年龄60~82岁），对照组65例（年龄60~85岁）。另设健康体检人员为正常组40名。上述人员对所用的治疗及检测指标均知情同意。③用药：治疗组服用中药糖骨康汤剂（由熟地黄、山萸肉、山药、锁阳、龟板、丹参、川芎组成，采用自动煎药机水煎包装）；对照组服用盖天力片(江苏启东盖天力制药厂生产)，两组同时口服西药常规降糖药，30 d为1疗程。④评估：治疗前后检测两组患者空腹血糖、糖化血红蛋白变化；比较正常组与两组患者治疗前骨密度、超氧化物歧化酶活性、丙二醛含量的差异。
结果：①两组患者空腹血糖以及糖化血红蛋白的比较：与治疗前比较，两组治疗后空腹血糖以及糖化血红蛋白均明显下降（P < 0.05或P < 0.01），但两组治疗后比较差异无统计学意义（P > 0.05）。②两组患者骨密度的比较：与治疗前比较，两组治疗后骨密度均明显上升（P < 0.05或P < 0.01），治疗组在升高骨密度方面优于对照组（P < 0.05）。③两组患者超氧化物歧化酶活性、丙二醛含量的比较：治疗后两组血清超氧化物歧化酶活性显著上升（P < 0.05或P < 0.01），丙二醛含量显著下降（P < 0.05或P < 0.01），治疗组在升高超氧化物歧化酶活性和降低丙二醛含量方面优于对照组（P < 0.05）。④正常组与治疗组、对照组患者骨密度、超氧化物歧化酶活性、丙二醛含量的比较：与正常组比较，治疗组、对照组患者骨密度和血清超氧化物歧化酶活性显著降低，丙二醛含量显著升高（P < 0.01）。
结论：糖骨康具有调节糖尿病骨质疏松患者自由基代谢，降低血糖，抑制骨质疏松的作用。
关键词：中药疗法；糖尿病；骨质疏松；丙二醛；超氧化物歧化酶；组织构建
张颖，于文浩，王秀玲.糖尿病性骨质疏松患者血清自由基代谢与糖骨康的影响[J].中国组织工程研究与临床康复，2008，12(7):1251-1254 [www.zglckf.com/zglckf/ejournal/upfiles/08-7/7k-1251(ps).pdf]
中图分类号:R681.4
文献标识码:B
文章编号:1673-8225
(2008)07-01251-04
收稿日期：2007-05-24
修回日期：2007-09-10
(07-50-5-3011/W·Q)
Effects of Tanggukang on serum free radical metabolism in patients with diabetic osteoporosis
Abstract
AIM:Diabetic patients are often combined with significant increase of lipid peroxide level. Increase of free radical can severe the development of diabetic complications. Tanggukang is the clinical prescription for diabetic osteoporosis. This study was aimed to investigate the effects of Tanggukang on bone mineral density, fasting blood glucose, glycosylated hemoglobin, the activity of superoxide dismutase and the content of malondialdehyde in serum of patients with diabetic osteoporosis.
METHODS: ①139 cases of diabetic osteoporosis were enrolled at Department of Gerontology of Handan First Hospital and Department of Orthopaedics of Shexian Traditional Chinese Hospital from March 2003 to March 2006. They were divided into two groups, treatment group（n =74）(aged 60-82 years) and control group (n =65) (aged 60-85 years). Forty healthy persons doing body examination were enrolled as normal group. All the subjects signed the informed consent. ②The patients of the treatment group were treated with Tanggukang (composed of prepared rehmannia root, fructus corni, dioscorea root, caulis cynomori, tortoise plastron, salvia miltiorrhiza and szechwan lovage rhizome; water decoction, and packed by automatic decocting medicine machine). Patients of the control group were treated with Gaitianli tablet produced by Jiangsu Qidong Gaitianli Pharmaceutical Factory. All the subjects orally took conventional hypoglycemic agents, 30 days as a course. ③Changes in fasting blood sugar and glycosylated hemoglobin were determined before and after the treatment. The differences in bone mineral density, activity of superoxide dismutase and the content of malonaldehyde between the persons of normal group and the patients were measured before and after the treatment.
RESULTS: ①Compared with that before treatment, fasting blood glucose and glycosylated hemoglobin levels were obviously reduced after treatment in the two groups (P < 0.05 or P < 0.01), but no significant difference was found after the comparison between two groups (P > 0.05). ②Compared with that before treatment, bone mineral density were markedly increased after treatment in two groups (P < 0.05 or P < 0.01), and the increase of bone mineral density in the treatment group surpassed the control group（P < 0.05）. ③Compared with that before treatment, the activity of serum superoxide dismutase was significantly increased (P < 0.05 or P < 0.01) and the content of malondialdehyde was decreased (P < 0.05 or P < 0.01) in two groups. The treatment group surpassed the control group（P < 0.05）. ④Compared with normal group, bone mineral density and activity of serum superoxide dismutase were remarkably decreased, and content of malondialdehyde was distinctly increased in the treatment group and control group (P < 0.01).
CONCLUSION: Tanggukang can decrease blood sugar，and prevent the osteoporosis through regulating the free radical metabolism of patients with diabetic osteoporosis.
Zhang Y, Yu WH, Wang XL.Effects of Tanggukang on serum free radical metabolism in patients with diabetic osteoporosis.Zhongguo Zuzhi Gongcheng Yanjiu yu Linchuang Kangfu 2008;12(7):1251-1254(China)
[www.zglckf.com/zglckf/ejournal/upfiles/08-7/7k-1251(ps).pdf]
0 引言
糖尿病为临床常见病、多发病，患者长期血糖控制不良可并发骨质疏松，尤以女性多见，约占糖尿病患者总数的24%~52%[1]。近年来研究发现，糖尿病骨质疏松的形成与微血管的病变关系密切[2-3]，而糖尿病患者的氧化水平增高为糖尿病微血管损害等并发症发生的中心环节，但探讨糖尿病骨质疏松与血清氧化水平关系的报道较少。糖骨康为治疗糖尿病骨质疏松症的临床验方，本文观察了该药对糖尿病骨质疏松患者骨密度、空腹血糖、糖化血红蛋白和超氧化物歧化酶、丙二醛的影响。
1 对象和方法
设计：随机对照观察。
单位：河北省邯郸市第一医院和河北省涉县中医院。
对象：选择2003-03/2006-03在邯郸市第一医院老年病科和涉县中医院骨科收治的糖尿病骨质疏松患者139例，按就诊先后顺序采用随机数字表法随机分成两组，治疗组74例，男33例，女41例，年龄60~82岁，平均(69.5±10.7)岁。对照组65例中，男30例，女35例，年龄60~85岁，平均(67.8±11.3)岁。两组患者在发病年龄、性别、病情、病程上差异均无显著性意义(P > 0.05)。另设健康体检人员为正常组40人，男18人，女22人，年龄59~ 83岁，平均(66.1±12.5)岁。上述人员对所用的治疗及检测指标均知情同意。
诊断及纳入排除标准：根据1997年美国糖尿病协会(ADA)提出的诊断及分型标准制订2型糖尿病诊断标准,并根据骨密度测定确诊为合并骨质疏松症。排除风湿、类风湿、原发性甲亢、原发性甲旁亢、胃切除、肝病等影响骨代谢的疾病；排除治疗期间服用皮质类固醇激素、噻嗪类利尿剂、钙剂、维生素D剂等影响骨代谢的药物的患者。
设计、实施、评估者：设计者第一作者，实施者第二作者，评估者第三作者。
技术路线：
给药方法：治疗组：糖骨康，由熟地黄、山萸肉、山药、锁阳、龟板、丹参、川芎组成，采用自动煎药机水煎包装，2次/d，200 mL/次，口服。对照组：盖天力片(江苏启东盖天力制药厂生产，规格：150 mg/片)，300 mg/d，2次/d，口服。以上两组均配合饮食控制和口服西药常规降糖药，以优降糖和二甲双胍为主，连续用药30 d 后检测指标。
骨密度测定：全部受检者均在跟骨处采用以色列单能量X线骨密度测定仪进行骨密度测定(单位mg/cm2)。
空腹血糖和糖化血红蛋白、超氧化物歧化酶活性和丙二醛含量测定：早晨空腹采集静脉血, 采用One touch血糖仪检测空腹血糖；采用比色法测定糖化血红蛋白，试剂盒由南京建成生物工程研究所提供，批号：20050913；采用黄嘌呤氧化酶法测定超氧化物歧化酶活性，采用硫代巴比妥酸法测定丙二醛含量；超氧化物歧化酶和丙二醛试剂盒由晶美生物工程公司提供，批号：050922。
主要观察指标：①两组患者空腹血糖以及糖化血红蛋白的比较。②两组患者骨密度的比较。③两组患者超氧化物歧化酶活性、丙二醛含量的比较。④正常组与治疗组、对照组患者超氧化物歧化酶活性、丙二醛含量的比较。
统计学方法：数据采用_x±s表示，显著性差异水平以0.05、0.01为标准，运用SPSS 13.0统计软件数据处理，统计方法采用组间比较的t检验、配对t检验。
2 结果
2.1 参与者数量分析 入患者139例，健康体检者40人，全部进入结果分析。
2.2 两组患者空腹血糖以及糖化血红蛋白的比较 见表1。
治疗后两组空腹血糖和糖化血红蛋白显著下降（P < 0.05或P < 0.01），两组比较差异无显著性（P > 0.05）。
2.3 两组患者骨密度的比较 见表2。
治疗后两组骨密度显著上升（P < 0.05或P < 0.01），治疗组在升高骨密度方面优于对照组（P < 0.05）。
2.4 两组患者超氧化物歧化酶活性、丙二醛含量的比较 见表3。
两组治疗后两组血清超氧化物歧化酶活性较治疗前显著升高，丙二醛含量较治疗前显著降低（P < 0.01或P < 0.05）；与对照组比较，治疗后治疗组血清超氧化物歧化酶活性和丙二醛含量差异有显著性（P < 0.05）。
2.5 正常组与两组患者治疗前骨密度、超氧化物歧化酶活性、丙二醛含量的比较 见表4。
与正常组比较，治疗组、对照组患者骨密度和血清超氧化物歧化酶活性显著降低，丙二醛含量显著升高（P < 0.01）。
����
3 讨论
糖尿病患者常伴有体内过氧化脂质水平的明显升高,而自由基增多可加重糖尿病并发症的发生和发展[4]。糖尿病慢性并发症发病的统一机制学说认为：引起糖尿病各并发症的 4 条共同通路[5-8]：多元醇通路激活、蛋白质非酶糖化增加、蛋白激酶 C 激活、己糖胺途径激活实质上都是高糖诱导的超氧化物过表达的结果, 氧自由基生成增多可能是糖尿病各种并发症发生的中心环节；也有人认为氧化应激是引起胰岛素抵抗糖尿病、动脉硬化的共同发病机制，即“共同土壤学说”[9]。研究发现，高血糖可显著增加过氧化物的产生，过氧化产物使 DNA 链断裂，激活聚 ADP－核糖聚合酶, 活化的聚 ADP－核糖聚合酶抑制磷酸甘油醛脱氢酶，最终导致 1 型与 2 型糖尿病患者大血管、微血管并发症的产生[10-12]。通过抑制氧化损伤，可改善糖尿病血管内皮细胞功能，减轻微血管损害[13-14]。
骨质疏松症是糖尿病慢性并发症之一。研究表明，糖尿病微血管并发症和骨的血流量减低可导致骨丢失和骨脆性增加[15-16]，因此，微血管并发症的出现是糖尿病患者骨量减少的一个临界因素，如：下肢血流量减少与髋部及跟骨骨质丢失呈正相关，因此糖尿病微血管病变是导致骨质疏松的重要原因[17]。但目前探讨糖尿病骨质疏松与患者血清氧化水平关系的临床报道较少，本组结果表明，与健康正常组比较，糖尿病骨质疏松患者存在着显著的氧化水平升高，抗氧化能力下降，自由基代谢失衡的状态，这可能是糖尿病并发骨质疏松的原因之一。
糖尿病骨质疏松属于“消渴”“骨痿”范畴，其形成与肾虚密切相关[18]。肾为先天之本，主骨生髓，骨生长发育强劲衰弱与肾精盛衰关系密切,肾精充足则骨髓生化有源,骨骼得以滋养而强健有力；肾精亏虚则骨髓生化无源,骨骼失养而痿弱无力。肾虚血瘀是消渴的主要证型之一，更是消渴并发骨痿的常见证型[19]。糖骨康，依照古方虎潜丸的组成改进而成，方中熟地黄、山萸肉、山药、锁阳、龟板补肾填精；丹参、川芎活血化瘀，全方共奏补肾活血之效，现代药理学研究表明，丹参、川芎具有改善微循环，降低血粘度的作用[20]。本组结果表明，糖骨康可降低血清丙二醛含量和血糖水平，提高超氧化物歧化酶活性，具有调节糖尿病骨质疏松患者自由基代谢，降低血糖，抑制骨质疏松的作用。
4 参考文献
1 Hu SW,Guo RL,Tong GH.Xi'an:People's Militery Medical Perss 2003
胡绍文，郭瑞林，童光涣.实用糖尿病学[M].2版.西安:人民军医出版社,2003
2 Liu CL,Zhao HB,Zhang XY,et al.Shandong Zhongyiyao Daxue Xuebao 2007;31(2)：167-168
刘春兰,赵宏兵,张学义，等.通脉灵颗粒对糖尿病模型大鼠内皮细胞功能的影响研究[J]. 山东中医药大学学报，2007，31(2)：167-168
3 Shen Y,Song DP.Linchuang HuiCui 2006；21(6)：444-446
沈芸,宋滇平.糖尿病与骨质疏松[J].临床荟萃，2006，21(6)：444-446
4 Xiang ZX,Huang C,Peng XJ,et al.Zhongxiyi Jiehe Xuebao 2006;4(3)：321-322
向志雄,黄诚,彭新君,等.中药治疗糖尿病及其并发症研究进展[J].中西医结合学报，2006，4(3)：321-322
5 Bronsky J,Prusa R.Amylin fasting plasma levels are decreased in patients with osteoporosis.OsteoprosInt 2004;15(3):243-247
6 Brown SA, Sharpless JL. Osteoporosis: an under 2 appreciated complication of diabetes. Clinical Diabetes 2004;22(1):10-20
7 Rejnmark L, Vestergaard P, Mosekilde L. Reduced fracture risk in users of thiazide diuretics. Calcif Tissue Int 2005;76(3):167
8 Rejnmark L,Vestergaard P,Kassem M,etal.Fracture risk perimenopausal women treated with beat2 blockers.Calcif Tissue Int 2004;75(5):365
9 Li WT,Zou JJ,Liu Y.Zhongguo Zuzhi Gongcheng Yanjiu Yu Linchuang Kangfu 2006;10(35)：54-56
李文桐,邹俊杰,刘岩.通络方剂抗氧化作用及对大血管内皮细胞的保护[J].中国组织工程研究与临床康复，2006，10（35）：54-56
10 Lupatteli G, Scarponi AM, Vaudo G, et al. Simvastatin increases bone mineral density in hypercholesterolemic postmenopausal women.Metabolism 2004;53(6):744
11 Lebel cp，Bondy SC.oxdative damage and cerebral aging.progress in neurobiology 1992;38（4）：601-609
12 Culter RG.Human longevity and aging:possible role of reactive oxygen species.annyacad sci 1991;62（1）:1-28
13 Loidig G, Zieglor R.Diabetes mellitus: a risk for osteoporosis.Exp Clin Endocrinol 2001; 109(Supple2): 493
14 Angela M, Inzerillo E, Solomon E. Osteoporosis and diabetes mellitus. Endocrine && Metabolic Disorders 2004;5(2):261-268
15 Kanis JA, Melton LJ, Christiansen C, et al. The diagnosis of osteoporosis. J Bone Miner Res 1994;9(8):1137
16 Suzuki K, Sugimoto C, Takizawa M, et al. Correlations between bone mineral density and circulating bone metabolic markers in diabetic patients. Diabetes Res Clin Bact 2000; 48(3):185-191
17 Gunczler P,Lanes R,Paoli M,et al.Decreased bone mineral density and bone formation markers shortly after diagnosis of clinical type 1 diabetes mellitus. J pediatr Endocrinol Metab 2001;14(5):525-528
18 Guo BR,Yang WJ,Zhang SS.Shandong Zhongyi Zazhi 2006;25(3)：157-158
郭宝荣,杨文军,张珊珊,等.益肾壮骨合剂治疗老年糖尿病合并骨质疏松症临床研究[J].山东中医杂志,2006,25(3):157-158
19 Xu LQ，Zhang RH,Cai Y,et al.Sichuan Zhongyi 2005;23(2)：27-28
徐立群，张荣华，蔡宇，等.糖尿病骨质疏松症中医病机和治则探讨[J].四川中医，2005，23(2)：27-28
20 Zhang TM.Beijing:China Press of Traditional Chinese Medicine 2000
张廷模.中药学[M].北京：中国中医药出版社，2000